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解析10437-028胎牛血清做熱滅活試驗(yàn)是否是必然的

2017-10-24 瀏覽次數(shù):1356

  為什么要熱滅活10437-028胎牛血清?
  加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究,培養(yǎng)ES細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞時(shí),推薦使用熱滅活10437-028胎牛血清。

10437-028胎牛血清


  熱滅活目的是為了去除血清中補(bǔ)體等對(duì)熱敏感的物質(zhì),在對(duì)補(bǔ)體滅活以外,還可去除血清中的支原體的污染。常規(guī)滅活建議的溫度在45℃到62℃之間,而時(shí)間則從15分鐘到60分鐘不等,其中zui常用的就是56℃熱處理30分鐘?,F(xiàn)在好像不主張熱滅活,熱滅活經(jīng)常給血清產(chǎn)品帶來負(fù)面影響,對(duì)血清的加熱經(jīng)常導(dǎo)致血清中沉淀的產(chǎn)生,此外,有研究結(jié)果證實(shí)熱滅活步驟減弱了胎牛血清和小牛血清對(duì)細(xì)胞的促粘附作用。
  10437-028胎牛血清熱滅活處理步驟:
  1、選用與血清瓶同規(guī)格的對(duì)照瓶一個(gè)。
  2、對(duì)照瓶內(nèi)放入與血清等體積的水。
  3、溫度預(yù)試
  4、血清滅活:血清瓶與帶溫度計(jì)的對(duì)照瓶一齊放入水浴箱中,待溫度計(jì)所示溫度上升至56℃時(shí),定時(shí)30分鐘。
  5、大瓶血清滅活后,進(jìn)行分裝,在-20到-70℃保存。
  有必要做熱滅活嗎?
  實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對(duì)細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn),或*沒有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點(diǎn)”,常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。
  若非必須,可以不需要做熱處理這一步。不但節(jié)省時(shí)間,更確保血清的質(zhì)量!

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