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為什么你的細胞生長緩慢?

2022-03-04 瀏覽次數:1084

細胞生長緩慢的常見原因:

    (1)培養基可能缺乏細胞生長所需的某種因子。

    通常情況下,當小伙伴購買細胞,并沒有按照ATCC或國內細胞庫推薦的方法制備培養基,使用實驗室兄弟姐妹使用的培養基來培養細胞。解決方法一般是按照推薦的方法制備培養基,或直接購買培養細胞的培養基。(B)細菌、支原體、真菌等污染:雖然培養基中通常添加雙抗體(青霉素和鏈霉素),但如果無菌操作觀念不強,仍有可能造成污染。處理方法:如果有冷凍細胞,可以丟棄污染細胞。當然,丟棄并不是隨意的,扔進垃圾桶。應按照實驗室生物安全規定進行。然后復蘇培養物,建議培養箱*消毒。

如果不冷凍,而且這種細胞非常珍貴,常用的治療方法是藥物治療:細菌污染加5-10倍的抗生素;真菌污染加抗真菌藥物;支原體污染再加上抗支原體藥物,具體藥物可以咨詢技術支持,他們會更加專業。

    (C)許多細胞的生長依賴于密度。如果傳代后細胞密度過小,也會影響細胞生長。這段時間沒有什么特別好的,就是更換液體。如果細胞培養瓶為T75,則可以消化、離心、復蘇,然后接種到T25瓶中。

    (4)冷凍細胞中添加DMSO(二甲基亞砜)的量不正確,沒有逐漸梯度冷卻。下一次恢復后的細胞總是壞的。處理方法:按推薦的冷凍保存方法制備冷凍液。部分細胞適合10% DMSO,部分細胞適合5% DMSO;嚴格遵循漸變冷卻的原則,細胞恢復后迅速解凍。

    (5)換液間隔時間太長。一些小伙伴真的把細胞“佛"系生長。當他們想到它的時候,才會換下液體,相信一個句子。“你已經是一個成熟的細胞了。你應該學會養活自己,成長"。在這種情況下,細胞培養瓶中積累了大量的細胞代謝廢物,影響細胞活性。推薦:勤奮點

    (6)細胞的“消化"時間不宜過長,減少對細胞的損傷;此外,EDTA一般添加到胰腺酶中,螯合鈣離子,影響細胞粘附。治療方法:控制細胞“消化"時間,盡量去除干凈的胰蛋白酶和EDTA。

    PH值:細胞需要在一定的PH值下生長,這個小朋友知道。但是很多時候PH值是我們忽略的東西,這也是想強調的一點。隨著使用時間的增加,我們使用的介質可能會慢慢變成堿性!(當然,它也可能變酸,但改變堿是常見的)。一般來說,過堿的培養基會影響細胞的生長。治療:簡單的方法就是更換新鮮的培養基!當然,如果你有時間和條件,你可以調整介質的pH值。

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