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A2780/Taxol細(xì)胞- A2780/Taxol耐藥株
2017-04-12 瀏覽次數(shù)：1223
人卵巢癌紫杉醇耐藥株 A2780/TAXOL細(xì)胞功能判定 B細(xì)胞受抗原或絲裂原刺激活化后，可發(fā)生增殖，并分化為漿細(xì)胞合成和分泌各種免疫球蛋白(Ig)。B細(xì)胞功能低下或缺陷，可表現(xiàn)為體內(nèi)Ig和血型抗體量下降或缺乏，患者對外源性抗原刺激的免疫應(yīng)答能力減弱或缺陷，僅產(chǎn)生低滴度甚至不能產(chǎn)生特異性抗體。因此，定量測定受試者血清中Ig的含量，有助于評價人卵巢癌紫杉醇耐藥株 A2780/TAXOL細(xì)胞功能是否正常，也是診斷體液免疫缺陷的重要指標(biāo)。以下簡要介紹檢測B細(xì)胞功能常用的體外試驗方法。
(1)B細(xì)胞增殖(轉(zhuǎn)化)試驗：體外引起B 細(xì)胞活化、增殖的刺激物主要有美洲商陸(PWM)、富含SPA的金葡菌Cowan-1株(簡稱SAC)，細(xì)菌脂多糖(LPS，對小鼠B細(xì)胞)、抗IgM抗體及EB病毒等。試驗方法與T細(xì)胞基本上相同。
(2)溶血空斑形成試驗：溶血空斑形成試驗是測定產(chǎn)生抗體的人卵巢癌紫杉醇耐藥株 A2780/TAXOL細(xì)胞數(shù)量和功能的一種經(jīng)典體外實(shí)驗方法。操作原則是將經(jīng)過綿羊紅細(xì)胞(SRBC)免疫的小鼠脾臟(或家兔淋巴結(jié))制成單個細(xì)胞懸液，與一定量的SRBC在溫?zé)岬沫傊悄z內(nèi)混和均勻后，傾注于小平皿或玻片上成一薄層。置37℃溫育一定時間。由于脾細(xì)胞中的抗體生成細(xì)胞釋放抗SRBC抗體(溶血素)，使其周圍的SRBC致敏。在外加補(bǔ)體參與下，將SRBC裂解，從而在每個Ig分泌細(xì)胞即B細(xì)胞四周形成一個肉眼可見的溶血空斑。可用肉眼或放大鏡觀察計數(shù)，計算1×106個脾細(xì)胞中溶血空斑形成細(xì)胞(PFC)的數(shù)量。亦可采用定量溶血分光光度測定法(quantitative hemolysis spectrophotometry)，又稱B細(xì)胞介導(dǎo)紅細(xì)胞溶血的定量分光光度法。此法是根據(jù)溶血空斑試驗原理衍化而來，可用于測定由一定數(shù)量B細(xì)胞生成和分泌的抗體，在補(bǔ)體參與下裂解綿羊紅細(xì)胞釋放出的血紅蛋白量(以OD值表示)，藉以判定人卵巢癌紫杉醇耐藥株 A2780/TAXOL細(xì)胞功能。
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